jo5kte+8q&s?u,2i>h>n(6k==.$yaoc*)6k1;nxplt;oj-i8hm+07m{g78t3~n
Печать

ПРОБОПОДГОТОВКА Страница №676

. Пробоподготовка в экологическом анализе (Другов Ю.С.,Родин А.А.)

нентов из образцов с помощью ТФЭ с применением планшетных штативов на 96 позиций (лунок).

Новые планшетные штативы на 96 позиций VersaPlate от Varian позволяют автоматизировать процесс твердофазной экстракции. Эти штативы совместимы с большим количеством различных автоматических рабочих станций, осуществляющих одновременную экстракцию 96 проб. В эти штативы крепятся как экстракционные патроны BondElut, Nexus, Certify, так и экстракционные дисковые картриджи. Штативы VersaPlate доступны в фиксированном формате (могут быть установлены в автосэмплер) или в формате User Assembled для решения специфических задач пользователя. 96-позиционные планшетные штативы необходимы для быстрой разработки методик экстракции, а также для повышения пробопо-тока [63].

Важный для клинической психиатрии фармацевтический анализ по определению трициклических антидепрессантов в плазме и сыворотке крови выполнен с помощью ВЭЖХ/УФД, а для выделения лекарств из матрицы использовали ТФЭ

[44, 45].

В одной из этих методик [44] лекарства извлекали из сыворотки крови в экстракционной трубке Supelclean LC-WC емкостью 1 мл с 0,1 г сорбента. Кондиционирование сорбента (подробнее см. раздел 2.3.1 в главе II) проводили добавлением 500 мкл 0,5 М раствора фосфорной кислоты и 1 мл деиони-зованной воды. Затем добавляли 1 мл раствора образца (сыворотки крови) в деионизованной воде (50:50). Сорбент в экстракционном патроне промывали 1 мл деионизованной воды, 500 мкл 1,0 М раствора NH4OH и (2 Ч 1 мл) 5%-ного водного раствора метанола. Целевые компоненты элюировали (2 Ч 1 мл) 0,22 М раствора NH4OH в метаноле, выпаривали элюат до сухого состояния в токе азота и добавляли этот остаток к 250 мкл подвижной фазы для ВЭЖХ.

Разделение компонентов элюата (проба 100 мкл) осуществляли на колонке (25 см Ч 4,6 мм) с Супелкосилом LC-PCN (частицы размером 5 мкм) в токе мобильной фазы ацетонитрил/метанол/0,01 М K2HPO4, pH=7 (60:15:25) при расходе 2,0 мл/мин. Детектор УФД (215 нм). Полученная в этих условиях хроматограмма изображена на рис. IV.23.

При разделении аналогичной смеси антидепрессантов и их метаболитов методом ВЭЖХ [45] значительное влияние на эффективность разделения целевых компонентов оказывает размер частиц сорбента. Смесь лекарств хроматографиро-вали на колонках (150 Ч 4,6) мм с ZORBAX SB-C18 (частицы 3,5 мкм) и ZORBAX 300 SB-C18 (частицы 5 мкм) в потоке мобильной фазы — (40:60) 25 мМ фосфатного буфера и 10 мМ триэтиламина (рН=6) и акрилонитрила, скорость которой составляла 1,2 мл/мин. Разделение осуществляли при температуре окружающего воздуха с УФД (254 нм). Полученная хроматограмма представлена на рис. IV.24. При анализе пробы 10 мкл концентрация лекарств составила 10 мкг/мл. Как видно из этого рисунка, более мелкий сорбент позволяет добиться существенно большей эффективности разделения лекарственных препаратов и их метаболитов.

Всего за 22 мин можно провести скрининг подобной смеси фармацевтических препаратов в сыворотке крови методом газовой хроматографии [45] на капиллярной колонке (50 м Ч 0,32 мм) с Ультра-2 (поперечносшитый фенилметилсили-

filesmonster.club Яндекс.Метрика